1、目视比色法

  目视比色法是用眼睛观察比较待测溶液和标准溶液颜色深浅的比色方法。将标准溶液和待测溶液在完全相同的条件下显色,若液层厚度相同,颜色的深浅一样时,两者的浓度必相等,这样由标准溶液的浓度可知待测溶液的浓度。

  目视比色法中,最常用的是标准系列法。在进行比色测定时,首先将一系列不同量的标准溶液依次置于一组比色管中,在实验条件相同情况下,加入等量的显色剂和其他试剂,稀释至刻度,配成一套颜色由浅至深的标准色列。然后将一定量的待测试液至于另一比色管中,在相同条件下显色,稀释至同一刻度。从管口垂直向下看,并与标准色列进行深浅比较。如果试液的颜色与标准色列中某一比色管的颜色深浅相同,则表示两者浓度相同;若被测试液介于两个标准试液之间,则被测试液浓度必定介于这两个标准试液之间,可取其平均值。

  标准系列法的优点是仪器简单,操作简便,只要配好标准色列比色就可进行,适用于大批试样分析;由于比色管液层较厚,使观察颜色的灵敏度较高,适宜于稀溶液中微量组分的测定;可在复合光下测定。缺点是目视比色法准确度较差,一般相对误差为5%-20%;标准色列配制比较费时,且有色物质常常不太稳定,不能久存,标准色列需要经常重配。虽然也可以用比较稳定的有色物质配制永久性的标准色列,但要经过校正后才能使用,比较费事。

  2、光电比色法

  用光电比色计测定溶液的吸光度进行定量分析的方法称为光电比色法。用仪器进行测量,可以消除人的主观误差,提高测量准确度。由光源发出的白光,经过滤光片,得到一定波长宽度的近似单色光,让单色光通过有色溶液,透过光射到光电池上,产生光电流,其大小与透过光的强度成正比。光电流的大小以灵敏检流计测量,在检流计上读出相应的透光率或吸光度。透过光强度愈弱,光电流愈小,其吸光度值则愈大。

  进行光电比色测定时,测定大批试样常采用工作曲线法,也称标准曲线法。工作曲线法是配置一系列标准比色液,在一定波长下分别测其吸光度。以吸光度为纵坐标,以浓度为横坐标,得到一条通过原点的直线,称为工作曲线或标准曲线。然后在同一条件下,测量被测试液的吸光度,在工作曲线上即可查得试液的浓度。(如图6.12)

工作曲线示意图

  与目视比色法比,光电比色法的优点是:用光电池代替了人的眼睛进行测量提高了精确度;当待测溶液中有多种有色物质共存时,可选用适当的滤光片或适当的参比溶液来消除干扰,因而提高了选择性;由于使用了工作曲线,分析大批试样时快速、简便。