1.水质监测中-培养基的制备与灭菌操作练习实验目的:

  (1)、学会灭菌前的准备工作。

  (2)、掌握培养基和无菌水的制备方法。

  (3)、掌握几种常用的灭菌方法和高压蒸汽灭菌技术。

  2.实验原理:

  培养基是以微生物生长繁殖所需要的各种营养物质,用人工方法配制而成的。其中含有水分、碳源、氮源、无机盐以及维生素等。用HCl溶液或NaOH溶液调节培养基的pH值,以保证微生物在最适宜的酸碱度范围内表现它们最大的生命活力并生长繁殖。

  灭菌是水质检验实验的基本技术之一。所谓灭菌,即指杀死一切微生物的细胞及芽孢或孢子。灭菌时利用高温,使菌体内的蛋白质发生凝固变性,从而杀死微生物,利用此原理可以去除物品上的一切细菌,达到无菌的目的。灭菌的方法很多,一般玻璃器皿可用干热灭菌,培养基采用湿热灭菌,无菌室或无菌箱可用紫外线消毒。本实验以高压蒸汽灭菌法给培养基灭菌,用干燥灭菌法给玻璃仪器灭菌。

  3.实验试剂:

  (1)、牛肉膏、蛋白胨、氧化钠、琼脂;

  (2)、10%HCl溶液、10%NaOH溶液、蒸馏水;

  (3)、精密pH试纸。

  4.实验仪器与设备:

  (1)、大、中、小号试管各4支、10mL刻度移液管1支、250mL烧杯、锥形瓶各1个。

  (2)、培养皿4套、1mL移液管4支、量筒、玻棒。

  (3)、托盘天平、酒精灯、三角架、石棉网、漏斗架、漏斗、带弹簧夹的橡皮管、玻璃导管。

  (4)、纱布、棉花(未脱脂)、旧报纸、细铁丝、剪刀、细绳、标签纸、硅胶塞。

  (5)、高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、培养箱、电冰箱、电炉。