滤膜法利用一种具有微孔的滤膜(多孔性的硝化纤维薄膜或乙酸纤维薄膜,与细菌滤器配套使用),用抽滤方法使水中的细菌截留在滤膜上,然后置于特制的选择培养基上培养,以菌落特征、镜检、乳糖发酵鉴定滤膜上生长的典型大肠菌群菌落。最后对滤膜上生长的总大肠菌群数以每100mL水样中的总大肠菌群数报告之(CFU/100mL)。例如,每50mL水样过滤1张滤膜共过滤2张滤膜,其中1张滤膜上生长的大肠菌群菌落数为20,另一张为15,则结果报告为(20+15)*100/(50+50)=35CFU/100mL。
滤膜法的主要步骤如下:
1、将滤膜装在细菌滤器(图7.7)上,用抽滤过滤定量的水样,使细菌截留在滤膜表面;
2、将此滤膜无菌的一面覆在品红亚硫酸钠或伊红美蓝培养基上,37℃培养24h,以培育获得单个菌落;
3、对滤膜上符合大肠菌群菌落特征的菌落进行革兰氏染色镜检;
4、将革兰氏染色阴性无芽孢杆菌的菌落接种到乳糖持养基中,根据产气与否判断大肠菌群的存在。
多管发酵法使用历史较久,适用于各种水样,是水的细菌学检验的标准分析法,但完成全部检验需要72h。滤膜法是一种快速的替代法,而且结果重复性好,操作简便,能测定大体积的水样,为我国大多数水厂和卫生单位所采用。但若水中杂质太多则易堵塞滤孔,所以滤膜法仅适用于水质浊度低的水样。